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易国华博士的转化

郭海涛

Lysor 在他/她的大作中提到，“还有那个电转化的问题易博士没有说。‘The 
ligation mixture was transformed in to E. coli TG1 cells by electroporation 
using a Gene Pulser electroporation apparatus (Bio-Rad) at 2.5 kV, 200 
ohms, 25 mF in 0.4 cm pre-chilled cuvettes.”我不知道这段实验方法描述是不是
从易博士发表的那篇受到质疑的论文中摘录出来的，也没时间去查对，但我知道他开始
做文库的时候确实用的这个条件，也确实有过电火花。因为戴老师实验室没有电转仪，
所以易博士总是到我们实验室做电转。我当时也做文库，电转用的比较多，所以易博士
总找我，大多是和贾晟松一起来，也有他自己或贾单独来。因为我用的是0.1cm的电转
杯，仪器设置是2.5 kV, 200 ohms, 25 mF，易博士拿过来的是个0.4cm的电击杯，我以
为他要做真核细胞，可他说他的宿主是E.coli TG1。当时我就对他的电击条件表示过质疑
，但易博士说没事。我以为他条件就这样，也就没多问。后来易博士还是用这个条件做
了，结果出现电火花，脉冲时间好象只有2.8ms的样子，反正不超过3ms.我告诉他这个
有问题，一般4-5ms才正常，并问他连接液沉淀过没有，他说没有。我建议他沉淀后改
变电压或换电击杯再做一次。后来他又做了好几次，我并不是每一次都在旁边，也不能
确定他是否换过条件，其中有几次他是找的我师兄。但我知道至少有一次他还是沿用的
这个条件，因为正好他做完了我也要用，我发现电压什么的都没变，还是那些参数。当
然也不排除他用完了又把电转仪的设置调回来，或者改用了0.1cm电击杯的可能。闲聊
的时候，我和师兄问过他实验进展，易博士每次都说文库还没建好，后来不知道他怎么
就建好了。

(XYS20031124)

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